Mejoramiento de un método no comercial para la extracción de ADN de moscas de interés médico-legal

La obtención de ADN de moscas de interés médico-legal es de relevancia para una variedad de aplicaciones. Aunque existen métodos de extracción comerciales de ADN, su uso rutinario es limitado, en algunos escenarios. En este contexto, el uso de métodos no comerciales constituye una alternativa; sin embargo, su optimización es clave para mejorar el flujo de trabajo y los resultados. Este trabajo evaluó el impacto de variaciones a un método de precipitación salina sobre la concentración y la pureza del ADN recuperado. No se encontraron diferencias significativas en la concentración de ADN extraído entre los diferentes tiempos de incubación, probados durante la fase de extracción, mientras que el incremento en el volumen de etanol absoluto, en la fase de precipitación de ADN, mejoró significativamente la concentración de ADN obtenido. Las modificaciones propuestas reducen el tiempo de ejecución y la concentración de ADN obtenido comparado con el protocolo original.

Obtaining DNA from flies of medico-legal interest is relevant for a variety of applications. Although commercial extraction methods offer optimal DNA, their routine use is limited in some settings. In this context, the use of non-commercial methods constitutes an alternative in laboratories with limited resources however, its optimization is key to improving the workflow and the results. This work evaluated the impact of variations to a saline precipitation method on the concentration and purity of the recovered DNA. No significant differences were found in the concentration of extracted DNA between the different incubation times tested during the extraction phase. In contrast, the increased volume of absolute ethanol in the DNA precipitation phase significantly improved the concentration of DNA obtained. The proposed modifications reduce the runtime and DNA concentration obtained compared with the original protocol.

First list of parasitoids in flies of medical, veterinary, and forensic importance in Rio Grande do Sul - Brazil / Primeira lista de parasitoides em moscas de importância médica, veterinária e forense no Rio Grande do Sul - Brasil

Necrophagous flies are of great importance for human and animal health. In places where their development occurs, parasitoids can be used as a tool to control these dipterans. In Brazil, the fauna of these parasitoids has been investigated in some regions. However, in Rio Grande do Sul, it is known the occurrence of only one species. Thus, this study aimed to create the first list of parasitoids in flies of medical and veterinary importance in Southern Brazil. Collections took place in the municipality of Pelotas (31º 42' S; 52º 18' W). Three replicates consisting of a 500 g bovine liver chunk placed in a tray were exposed to open air for 20 days. Then pupae were individualized and observed until their emergence. We identified 4,882 adult flies of Calliphoridae, Fanniidae, Muscidae, and Sarcophagidae. 4,040 parasitoids emerged, belonging to eight species, of which Nasonia vitripennis, Spalangia cameroni, Spalangia chontalensis, and Tachinephagus zealandicus are new records in Rio Grande do Sul state. Also, three undescribed species of the genus Aphaereta were collected. In spite of being the first attempt to inventory the fauna of hymenopteran parasitoids, this study may help in the development of management programs of these dipterans in the region.

Moscas necrófagas possuem grande importância para a sanidade humana e animal. Onde estas se desenvolvem ocorrem parasitoides que podem ser utilizados como ferramentas para o controle desses dípteros. No Brasil, a fauna desses parasitoides vem sendo investigada em algumas regiões e no Rio Grande do Sul é conhecida a ocorrência de apenas uma espécie. Portanto, o objetivo deste estudo foi criar a primeira lista de espécies de parasitoides de moscas de importância médica e veterinária ocorrentes no extremo sul do Brasil. As coletas foram realizadas no município de Pelotas (31º 42' S; 52º 18' O). Foram montadas três réplicas de bandejas contendo, cada uma, 500 g de fígado bovino, expostas ao ar livre durante 20 dias. Na sequência, as pupas foram individualizadas e observadas até a emergência. Foram identificados 4.882 adultos pertencentes às famílias Calliphoridae, Fanniidae, Muscidae e Sarcophagidae. Emergiram 4.040 parasitoides, pertencentes a oito espécies, das quais Nasonia vitripennis, Spalangia cameroni, Spalangia chontalensis e Tachinephagus zealandicus são novas ocorrências para o Rio Grande do Sul. Foram coletadas três espécies ainda não descritas do gênero Aphaereta. Apesar de ainda ser um primeiro esforço de inventariar a fauna de himenópteros parasitoides, este estudo pode auxiliar no desenvolvimento de programas de manejos desses dípteros na região.

First list of parasitoids in flies of medical, veterinary, and forensic importance in Rio Grande do Sul – Brazil / Primeira lista de parasitoides em moscas de importância médica, veterinária e forense no Rio Grande do Sul - Brasil

Necrophagous flies are of great importance for human and animal health. In places where their development occurs, parasitoids can be used as a tool to control these dipterans. In Brazil, the fauna of these parasitoids has been investigated in some regions. However, in Rio Grande do Sul, it is known the occurrence of only one species. Thus, this study aimed to create the first list of parasitoids in flies of medical and veterinary importance in Southern Brazil. Collections took place in the municipality of Pelotas (31º 42' S; 52º 18' W). Three replicates consisting of a 500 g bovine liver chunk placed in a tray were exposed to open air for 20 days. Then pupae were individualized and observed until their emergence. We identified 4,882 adult flies of Calliphoridae, Fanniidae, Muscidae, and Sarcophagidae. 4,040 parasitoids emerged, belonging to eight species, of which Nasonia vitripennis, Spalangia cameroni, Spalangia chontalensis, and Tachinephagus zealandicus are new records in Rio Grande do Sul state. Also, three undescribed species of the genus Aphaereta were collected. In spite of being the first attempt to inventory the fauna of hymenopteran parasitoids, this study may help in the development of management programs of these dipterans in the region.

Moscas necrófagas possuem grande importância para a sanidade humana e animal. Onde estas se desenvolvem ocorrem parasitoides que podem ser utilizados como ferramentas para o controle desses dípteros. No Brasil, a fauna desses parasitoides vem sendo investigada em algumas regiões e no Rio Grande do Sul é conhecida a ocorrência de apenas uma espécie. Portanto, o objetivo deste estudo foi criar a primeira lista de espécies de parasitoides de moscas de importância médica e veterinária ocorrentes no extremo sul do Brasil. As coletas foram realizadas no município de Pelotas (31º 42' S; 52º 18' O). Foram montadas três réplicas de bandejas contendo, cada uma, 500 g de fígado bovino, expostas ao ar livre durante 20 dias. Na sequência, as pupas foram individualizadas e observadas até a emergência. Foram identificados 4.882 adultos pertencentes às famílias Calliphoridae, Fanniidae, Muscidae e Sarcophagidae. Emergiram 4.040 parasitoides, pertencentes a oito espécies, das quais Nasonia vitripennis, Spalangia cameroni, Spalangia chontalensis e Tachinephagus zealandicus são novas ocorrências para o Rio Grande do Sul. Foram coletadas três espécies ainda não descritas do gênero Aphaereta. Apesar de ainda ser um primeiro esforço de inventariar a fauna de himenópteros parasitoides, este estudo pode auxiliar no desenvolvimento de programas de manejos desses dípteros na região.

First list of parasitoids in flies of medical, veterinary, and forensic importance in Rio Grande do Sul Brazil

Abstract Necrophagous flies are of great importance for human and animal health. In places where their development occurs, parasitoids can be used as a tool to control these dipterans. In Brazil, the fauna of these parasitoids has been investigated in some regions. However, in Rio Grande do Sul, it is known the occurrence of only one species. Thus, this study aimed to create the first list of parasitoids in flies of medical and veterinary importance in Southern Brazil. Collections took place in the municipality of Pelotas (31º 42 S; 52º 18 W). Three replicates consisting of a 500 g bovine liver chunk placed in a tray were exposed to open air for 20 days. Then pupae were individualized and observed until their emergence. We identified 4,882 adult flies of Calliphoridae, Fanniidae, Muscidae, and Sarcophagidae. 4,040 parasitoids emerged, belonging to eight species, of which Nasonia vitripennis, Spalangia cameroni, Spalangia chontalensis, and Tachinephagus zealandicus are new records in Rio Grande do Sul state. Also, three undescribed species of the genus Aphaereta were collected. In spite of being the first attempt to inventory the fauna of hymenopteran parasitoids, this study may help in the development of management programs of these dipterans in the region.

Resumo Moscas necrófagas possuem grande importância para a sanidade humana e animal. Onde estas se desenvolvem ocorrem parasitoides que podem ser utilizados como ferramentas para o controle desses dípteros. No Brasil, a fauna desses parasitoides vem sendo investigada em algumas regiões e no Rio Grande do Sul é conhecida a ocorrência de apenas uma espécie. Portanto, o objetivo deste estudo foi criar a primeira lista de espécies de parasitoides de moscas de importância médica e veterinária ocorrentes no extremo sul do Brasil. As coletas foram realizadas no município de Pelotas (31º 42 S; 52º 18 O). Foram montadas três réplicas de bandejas contendo, cada uma, 500 g de fígado bovino, expostas ao ar livre durante 20 dias. Na sequência, as pupas foram individualizadas e observadas até a emergência. Foram identificados 4.882 adultos pertencentes às famílias Calliphoridae, Fanniidae, Muscidae e Sarcophagidae. Emergiram 4.040 parasitoides, pertencentes a oito espécies, das quais Nasonia vitripennis, Spalangia cameroni, Spalangia chontalensis e Tachinephagus zealandicus são novas ocorrências para o Rio Grande do Sul. Foram coletadas três espécies ainda não descritas do gênero Aphaereta. Apesar de ainda ser um primeiro esforço de inventariar a fauna de himenópteros parasitoides, este estudo pode auxiliar no desenvolvimento de programas de manejos desses dípteros na região.

Sucesión de entomofauna de interés criminalista en modelo experimental de Cavia porcellus / Succession of entomofauna of criminal interest in experimental model of Cavia porcellus

La Entomología Forense (EF) es una rama de las ciencias médico-legales (Ortloff et al. 2012), que utiliza como herramienta clave a insectos y otros artrópodos que interactúan con un cuerpo en descomposición (Gennard, 2007). El presente estudio se basó en un diseño observacional descriptivo de tipo poblacional, en el que se evaluó la diversidad de dípteros de la familia Calliphoridae y Muscidae en la parroquia rural de Posorja, Guayaquil. En el proceso experimental en los biomodelos A y B, se obtuvo que las temperaturas mínimas diarias presentaron un promedio de 21 °C (entre 20 °C y 22 °C) en lo que respecta a las temperaturas máximas diarias presentaron un promedio de 29,50 °C (entre 26 y 31 °C). En ambos biomodelos experimentales A y B, la exposición directa a los rayos solares y el espacio de liberación abierto contribuyo con el desarrollo de los cambios post mortem de descomposición cadavérica, como son el cromatismo, hinchado, licuefacción y reducción. A la par, de la ocurrencia de la sucesión de dípteros de interés criminalisticos, pertenecientes a las familias Calliphoridae y Muscidae. La importancia de de este acercamiento a la fauna de interés forense dentro de la provincia de Posorja, se muestra en el abanico de oportunidades que abre, con miras a la futura incorporación de la entomología forense en investigaciones criminalísticas en casos de homicidios y negligencias. Sin embargo, todavía eisten numerosas dificultades dificultades para este tipo de estudio en el Ecuador, por lo que se propone divulgar la escala estacional y espacial de de estas investigaciones, a través de convenios que permitan replicarlos en diversas partes del país en distintos ecosistemas y bajo distintas condiciones climáticas(AU)

Forensic Entomology (PE) is a branch of the medico-legal sciences (Ortloff et al. 2012), which uses insects and other arthropods that interact with a decomposing body as a key tool (Gennard, 2007). The present study was based on a descriptive observational design of a population type, in which the diversity of diptera of the Calliphoridae and Muscidae families in the rural parish of Posorja, Guayaquil was evaluated. In the experimental process in biomodels A and B, it was obtained that the minimum daily temperatures presented an average of 21 ° C (between 20 ° C and 22 ° C) with regard to the maximum daily temperatures presented an average of 29, 50 ° C (between 26 and 31 ° C). In both experimental biomodels A and B, direct exposure to sunlight and the open release space contributed to the development of post-mortem changes in cadaveric decomposition, such as chromaticism, swelling, liquefaction and reduction. At the same time, the occurrence of the succession of diptera of criminalistic interest, belonging to the Calliphoridae and Muscidae families. The importance of this approach to the fauna of forensic interest within the province of Posorja is shown in the range of opportunities that it opens up, with a view to the future incorporation of forensic entomology in criminal investigations in cases of homicides and negligence. However, there are still numerous difficulties for this type of study in Ecuador, so it is proposed to disclose the seasonal and spatial scale of these investigations, through agreements that allow replication in different parts of the country in different ecosystems and under different weather conditions(AU)

Determinación del intervalo post mortem mínimo (IPM) basado en un modelo de acumulación térmica con una cepa de Lucilia eximia (Diptera: Calliphoridae) de Costa Rica / Lucilia eximia (Diptera: Calliphoridae) as forensic indicator for the calculation of the post mortem interval in Costa Rica

RESUMEN Introducción: L. eximia es una especie de amplia distribución geográfica en Costa Rica, cuyas poblaciones son estables durante todo el año. Las características biológicas de ésta permiten concebirla como un potencial indicador forense para el cálculo del intervalo post mortem mínimo (IPM). Objetivo: Comparar el IPM calculado mediante un modelo de acumulación térmica con L. eximia (Diptera: Calliphoridae), con el IPM real en cadáveres de cerdos domésticos (Sus scrofa). Material y Métodos: Dos cadáveres de cerdo fueron expuestos en un bosque premontano húmedo tropical. A partir de dichos cadáveres se colectaron larvas de L. eximia a las 78, 144 y 192 horas posteriores al momento de muerte y se propició su desarrollo en condiciones controladas. Con los datos generados, se realizaron retroproyecciones térmicas para efectuar el cálculo del IPM. Resultados: L. eximia requirió en total 7 236,50 grados- hora acumulados (ADH) para culminar su desarrollo. Los IPM calculados mediante el modelo de acumulación térmica para los tres momentos de colecta fueron 112,56; 153,60 y 104,64 horas. Únicamente el valor intermedio no presentó diferencias estadísticamente significativas con el tiempo de muerte conocido (p>0.05). Conclusiones: El modelo de acumulación térmica en que se utilizó L. eximia brindó información precisa sobre el IPM sólo cuando se tomaron las muestras en el campo a las 144 horas, lo que perfila su utilidad para las primeras etapas de la descomposición cadavérica.

ABSTRACT Introduction: L. eximia is a species that shows a wide geographical distribution in Costa Rica, whose populations are stable throughout the year. The biological characteristics of L. eximia allow it to be considered as a potential forensic indicator for the calculation of the minimum post mortem interval (PMI). Objective: To compare the PMI calculated by a thermal accumulation model with L. eximia (Diptera: Calliphoridae), with the PMI in corpses of pigs (Sus scrofa). Methods: Two pig corpses were exposed in a tropical premontane moist forest. Larvae of L. eximia were collected from the pig carcasses at 78, 144 and 192 hours after the moment of death, and their development was promoted under controlled conditions. With the data generated, thermal back-projections were made to calculate the PMI. Results: L. eximia required a total of 7 236.50 accumulated degree hours (ADH) to complete its life cycle. The IPMs calculated by the thermal accumulation model were 112.56, 153.60, and 104.64 hours, respectively. Only the intermediate value did not present statistically significant differences with the known time of death (p>0.05). Conclusions: The thermal accumulation model using L. eximia as a forensic indicator provided accurate information about the PMI only when samples were collected at 144 hours, which indicates that this method may be accurate and useful during the first stages of cadaveric decomposition.

Insects of forensic importance associated to cadaveric decomposition in a rural area of the Andean Amazon, Caquetá, Colombia / Insetos de importância forense associados à decomposição cadavérica em uma área rural na Amazônia Andina, Caquetá, Colômbia

ABSTRACT Forensic entomology is a frequently used tool to estimate the time interval between death and the discovery of the corpse. Succession of arthropods associated with cadaveric decomposition was monitored in a rural area of the Municipality of Florencia, Department of Caquetá, Colombia. Three pigs (Sus scrofa) were used as study models. Insect sampling, and monitoring of carcasses and environmental conditions were carried out every five hours. The total time from death to skeletonization was of 545 hours (22.7 days). A total of 30833 insect individuals were collected. Specimens were distributed in nine orders, 46 families, 95 genera and 106 species. Diptera was the most abundant, with 23215 individuals (75.3%), followed by Coleoptera, with 3711 individuals (12%), and Hymenoptera, with 3154 individuals (10.2%). Immature stages of Cochliomyia macellaria, Chrysomya albiceps, Hemilucilia semidiaphana and Ophyra aenescens were the main species involved in tissue consumption and acceleration of the decomposition process. Due to the presence of ants Cheliomyrmex sp., Camponotus sp. and Dinoponera sp., and coleopterans Hister sp., Acylophorus sp. and Philonthus spp., it was not possible to obtain sufficient Diptera egg masses for rearing the colonizing species. These results can be used as a standard to determine the postmortem interval in criminal investigations in the rural area of the Andean Amazon, Caquetá, Colombia.

RESUMO A entomologia forense é uma ferramenta frequentemente utilizada para estimar o intervalo de tempo entre a morte e a descoberta do corpo. Na área rural do município de Florencia, Caquetá, foi monitorada a sucessão de artrópodes associados à decomposição cadavérica, utilizando como modelo de estudo os cadáveres de três porcos (Sus scrofa). A amostragem de insetos e coleta de dados ambientais foram realizadas a cada cinco horas. A duração total do processo desde a morte até a esqueletização foi de 545 horas (22,7 dias). Foram coletados 30833 espécimes de insetos, distribuídos em nove ordens, 46 famílias, 95 gêneros e 106 espécies. Diptera foi o grupo mais representativo, com 23215 indivíduos (75,3%), seguido de Coleoptera, com 3711 indivíduos (12%) e Hymenoptera, com 3154 indivíduos (10,2%). Os estágios imaturos de Cochliomyia macellaria, Chrysomya albiceps, Hemilucilia semidiaphana e Ophyra aenescens foram as principais espécies envolvidas no consumo de tecidos e na aceleração do processo de decomposição. Devido à presença de formigas Cheliomyrmex sp., Camponotus sp. e Dinoponera sp. e de besouros Hister sp., Acylophorus sp. e Philonthus spp., não foi possível obter massas de ovos de Diptera suficientes para a criação de espécies colonizadoras. Nosso estudo fornece subsídios para determinar o intervalo post-mortem em investigações policiais e promover a entomologia forense em uma área rural da Amazônia Andina na Colômbia.

Intra-puparial development of Lucilia eximia (Diptera, Calliphoridae) / Desenvolvimento Intra-pupal de Lucilia eximia (Diptera: Calliphoridae)

There are few studies about the intra-puparial development in Diptera, nonetheless its importance has been increased because several dipteran species are of forensic interest. Studies on the life cycles of flies often disregard the changes that occur inside the pupae. The objectives of this research were to analyze the intra-puparial development of Lucilia eximia, and to describe chronological and morphological changes that occur during this stage. Around 1.600 specimens were laboratory-reared. The pre-pupae were identified by the reduction of their size and change in coloration, and 10 individuals were sampled every three hours (n=1.000) until adult emergence. The specimens were fixed in 96% alcohol, subsequently immersed in Canoy solution for 24 hours and in formic acid (5%) for 48 hours, to facilitate dissection and analysis of the morphological changes of the individuals. Four stages of the intra-pupal development of L. eximia were observed: 1) Larva-pupa apolysis, which lasted 23 ± 1.08 h; 2) Cryptocephalic pupa, 5 ± 0.53 h; 3) Phanerocephalic pupa, 92 ± 1.94 h; and 4) Pharate adult: Transparents eyes, 125 ± 2.15 h; Yellow eyes, 23 ± 0.89 h; Pink eyes, 14 ± 0.73 h; and Red eyes, 20 ± 0.60 h. The pharate adult is completely formed after 296 hours and the emergence of the adult occurred after 302 ± 3.81 h. In addition, there were included the stage of pre-pupa, pupariation and the beginning of the adult stage, Imago and adult emergence. Each stage is described and compared with those described for Chrysomya albiceps (Calliphoridae).

No mundo existem poucos estudos sobre o desenvolvimento intrapupal de Diptera. Comumente, os estudos dos ciclos de vida das espécies de moscas são feitos eliminando o desenvolvimento embrionário que é muito importante, principalmente nas espécies de interesse forense. O principal objetivo foi o de analisar o desenvolvimento intrapupal de Lucilia eximia, descrevendo as mudanças morfológicas que ocorrem durante o desenvolvimento intrapupal. Foram analisados cerca de 1.600 espécimes cultivados em laboratório. Foram analisadas as fases de pré-pupa, pupa, o início da fase adulta, a imago e a emergência. Pré-pupas foram identificadas de acordo com a redução no tamanho e na alteração da coloração. Dez espécimes foram coletados a cada três horas (n=1.000), sem interrupção, até a emergência dos adultos. As pupas foram fixadas em etanol a 96%. Em seguida foram imersas em solução Carnoy por 24 horas e ácido fórmico a 5% por 48 horas para facilitar a dissecação e análises das alterações morfológicas. Foram determinados 4 estágios de desenvolvimento intrapupal. 1) Apólise larva-pupa com duração de 23 ± 1,08 h; 2) Pupa criptocefálica: 5 ± 0,53 h; 3) Pupa fanerocefálica: 92 ± 1,94 h e; 4) Adulto farado: olhos transparentes: 125 ± 2,15 h; olhos amarelos: 23 ± 0,89 h; olhos róseos: 14 ± 0,73 h e olhos vermelhos 20 ± 0,60 h. O adulto farado estava completo após 296 horas e a emergência dos adultos ocorreu com 302 ± 3,81 h. Cada fase foi descrita e comparada com o descrito para Chrysomya albiceps (Calliphoridae).

Record and foraging behavior of ants (Hymenoptera, Formicidae) in vertebrate carcasses / Registro de forrageio de formigas (Hymenoptera, Formicidae) em carcaças de vertebrados

Knowing the importance of participation by insects at cadaverous decomposition processes, and the limited use of the family Formicidae in criminal investigations, this study aims to record the foraging activity of four genera of ants in carcasses of birds and mammals. Observations occurred accidentally in two locations in the State of Minas Gerais, Brazil. In total, seven species of ants foraging in eight vertebrate carcasses were recorded. In addition, the study reported for the first time the presence of Wasmannia in carcasses in Brazil.

Sabendo da importância da participação dos insetos em processos de decomposição cadavérica e do uso limitado da família Formicidae em investigações criminais, o objetivo do presente estudo foi registrar a atividade de forrageio de quatro gêneros de formigas em carcaças de aves e mamíferos. As observações ocorreram de forma acidental em duas localidades do Estado de Minas Gerais, Brasil. No total, foram registradas sete espécies de formigas forrageando em oito carcaças de vertebrados. O trabalho registrou ainda pela primeira vez a presença do gênero Wasmannia em carcaças no Brasil.

Differential Diptera succession patterns onto partially burned and unburned pig carrion in southeastern Brazil / Diferenças no padrão de sucessão de Diptera em carcaças de porco parcialmente carbonizadas e não carbonizadas

In the present contribution we compared the entomological succession pattern of a burned carcass with that of an unburned one. For that, we used domestic pig carcasses and focused on Calliphoridae, Muscidae and Sarcophagidae flies, because they are the ones most commonly used in Postmortem Interval estimates. Adult and immature flies were collected daily. A total of 27 species and 2,498 specimens were collected, 1,295 specimens of 26 species from the partially burned carcass and 1,203 specimens of 22 species from the control carcass (unburned). The species composition in the two samples differed, and the results of the similarity measures were 0.875 by Sorensen and 0.756 by Bray-Curtis index. The results obtained for both carcasses also differ with respect to the decomposition process, indicating that the post mortem interval would be underestimated if the entomological succession pattern observed for a carcass under normal conditions was applied to a carbonized carcass.

Nesta contribuição, nós comparamos o padrão de sucessão entomológica de uma carcaça carbonizada com outra não carbonizada. Para tal, nós usamos carcaças de porcos domésticos e focamos nos dípteros Calliphoridae, Muscidae e Sarcophagidae, por estes serem os grupos de insetos mais comumente usados na estimativa do intervalo pós-morte. Moscas adultas e seus imaturos foram coletados diariamente. Um total de 27 espécies e 2.498 espécimes foi coletado, 1.295 espécimes de 26 espécies na carcaça parcialmente carbonizada e 1.203 espécimes de 22 espécies na carcaça controle (não carbonizada). A composição específica das duas amostras foi diferente e os cálculos de similaridade resultantes foram 0,875 pelo índice de Sorensen e 0,756 pelo índice de Bray-Curtis. Os resultados obtidos para ambas as carcaças também diferiram em relação ao processo de decomposição, indicando que o intervalo pós-morte poderia ser subestimado se o padrão de sucessão entomológica observado na decomposição de uma carcaça sob condições normais fosse aplicado a uma carcaça carbonizada.

Beetles (Insecta, Coleoptera) associated with pig carcasses exposed in a Caatinga area, Northeastern Brazil / Coleópteros (Insecta, Coleoptera) associados a carcaças de suínos em Caatinga, Nordeste do Brasil

The species richness, abundance and seasonality of Coleoptera fauna associated with pig carcasses exposed in a Caatinga area were examined. Tray, pitfall and modified Shannon traps were settled together to collect these insects during two seasons (dry and rainy). 4,851 beetles were collected, belonging to 19 families and 88 species. Staphylinidae (2,184) and Histeridae (1,264) were the most abundant families and accounted for 71.1% of the specimens collected. Scarabaeidae (15) showed the highest species richness. The most abundant species were Atheta iheringi Bernhauer, 1908 (Staphylinidae) (1,685), Euspilotus sp. (Histeridae) (461), Stelidota geminata (Say, 1825) (Nitidulidae) (394), Xerosaprinus diptychus (Marseul, 1855) (Histeridae) (331) and Dermestes maculatus De Geer, 1774 (Dermestidae). Amongst these species, X. diptychus showed to be strongly influenced by seasonality, since 96.1% of the specimens were collected during the dry season.

A riqueza, abundância e sazonalidade da coleopterofauna associada a carcaças de suínos expostas em uma área de Caatinga foram examinadas. Para captura desses insetos foram utilizadas armadilhas do tipo bandeja, pitfall e Shannon modificada, durante duas estações (seca e chuvosa). 4.851 coleópteros foram coletados, pertencentes a 19 famílias e 88 espécies. Staphylinidae (2.184) e Histeridae (1.264) foram as famílias mais abundantes e somaram 71,1% dos espécimes coletados. Scarabaeidae (15) apresentou a maior riqueza. As espécies mais abundantes foram Atheta iheringi Bernhauer, 1908 (Staphylinidae) (1,685), Euspilotus sp. (Histeridae) (461), Stelidota geminata (Say, 1825) (Nitidulidae) (394), Xerosaprinus diptychus (Marseul, 1855) (Histeridae) (331) e Dermestes maculatus De Geer, 1774 (Dermestidae). Entre essas espécies, X. diptychus mostrou-se fortemente influenciada pela sazonalidade, uma vez que 96,1% dos espécimes foram coletados durante a estação seca.

Musca domestica (Diptera: Muscidae) breeding various pig tissues

Musca domestica (L. 1758) is a cosmopolitan species that presents a high degree of associationwith human environments. This fly has been encountered carrying several pathogens and has beenfound associated with animal carcasses and human corpses in various countries. In this study, thecapacity of larvae of M. domestica to breed in various pig tissues was tested. Larvae of this specieswere transferred to flasks containing liver, abdominal fat, meat, lung and brain tissues. The flaskswere maintained in an incubator at 25 ºC ± 1 ºC, 70 percent ± 10 percent to humidity, and with a 12h/12h light/darkphotoperiod until the emergence of the imagoes. The rates of development of larvae were assessed.The larvae did not reach adulthood in fat and liver. Comparisons between data from different tissuesindicated differences in the size, weight and development of larvae of the same age. Brain andmuscle were the substrates that had the lowest frequencies of emergence of imagoes. A longer timefor development was observed in the brain, while shorter times were observed in lung and intestine.Lung and intestine were also the substrates from which greater numbers of imagoes emerged. Larvaein muscle presented smaller size and lower weight. Because M. domestica is capable of breedingin various tissues in the laboratory, its breeding capacity and abundance in carrion may depend onthe biological and environmental conditions encountered outdoors. The influence of the factorsstudied when used in forensic entomology, should be taken into account, especially as an indicatorof postmortem interval.

Musca domestica (L. 1758) é uma espécie cosmopolita que apresenta elevado grau de associação com ambientes humanos. Esta mosca tem sido encontrada veiculando um grande número de patógenos e em associação com carcaças de animais e cadáveres humanos em vários países. Neste estudo, foi testada a capacidade de larvas de M. domestica de se desenvolver em vários tecidos suínos. Larvas foram transferidas para frascos contendo fígado, gordura abdominal, carne, pulmão e tecidos cerebrais. Os frascos foram mantidos em estufa a 25 ± 1 ºC, 70 ± 10 por cento de umidade e fotoperíodo 12h/12h até a emergência dos imagos. As taxas de desenvolvimento dos imaturos foram acompanhadas. As larvas não se desenvolveram até adultos na gordura e no fígado. As comparações entre os dados originários de diferentes tecidos indicaram diferenças no tamanho, peso e o desenvolvimento das larvas. Cérebro e músculo foram os substratos que apresentaram menores frequências de emergência de imagos. Observou-se um maior tempo de desenvolvimento no cérebro, enquanto que menores tempos foram observados no pulmão e no intestino. Pulmão e intestino também foram os substratos em que a mosca teve maior número de imagos emergidos. Larvas criadas no músculo apresentaram menor tamanho e menor peso. Considerando que M. domestica é capaz de criar em vários tecidos/substratos em laboratório, sua capacidade de reprodução e abundância em carcaças pode depender das condições biológicas e ambientais encontradas no campo. Deve-se considerar a influência dos fatores estudados, quando esta espécie for utilizada como indicador na entomologia forense, especialmente como indicador de intervalo post-morte.

Coleopterofauna found on fresh and frozen rabbit carcasses in Curitiba, Parana, Brazil / Coleopterofauna encontrada em carcacas de coelho congeladas e frescas em Curitiba, Parana, Brasil

Many arthropod species are associated with carrion and some of them can be used as forensic indicators in murder investigations to estimate the time of death. Different physical conditions of cadavers may influence the fauna and the importance of freezing and thawing is unknown. The present paper sought to survey the Coleoptera species encountered in frozen and fresh rabbit carcasses, at a forest in Curitiba, Brazil. Four rabbit carcasses, two of them fresh and the other frozen were used. The coleopterofauna was sampled daily, and analyzed using non-parametric tests. A total of 666 beetles were sampled, belonging to 28 species in 10 families. Most of the beetles captured were larvae of Oxelytrum spp. (433) which are known to be necrophagous. The two frozen carcasses accounted for most of the beetles (338 and 180) in comparison with the two fresh carcasses (103 and 45). The tests were based on the most abundant species. Oxelytrum spp. median differed significantly between carcasses (H = 12.47844; p = 0.0059). The two fresh carcasses differed significantly (U = 190.0; p = 0.00019), but there was no significant difference between the frozen carcasses (U = 336.0; p = 0.29755). The data indicate that the freezing process prevents certain species to colonize carcasses, in this case with the dominance of species of Oxelytrum. These data also indicate that careful attention is necessary before using frozen carcasses in forensic entomology studies.

Muitas espécies de artrópodes são associadas a carcaças e algumas delas podem ser utilizadas em casos de morte violenta como indicadoras forenses do intervalo decorrido desde a morte do indivíduo. Diferentes condições físicas dos cadáveres podem influenciar a fauna, sendo que o efeito do congelamento e descongelamento é desconhecido. Os objetivos do presente trabalho foram levantar as espécies de Coleoptera em carcaças de coelho frescas e congeladas em um remanescente florestal localizado em Curitiba, Brasil. Foram utilizadas quatro carcaças de coelhos, dois frescos e dois previamente congelados. A coleopterofauna foi amostrada diariamente e analisada com testes não paramétricos. Foram coletados 666 espécimes, pertencentes a 28 espécies, de 10 famílias. A maioria dos besouros coletados foi representada por larvas de Oxelytrum spp. (433), as quais são necrófagas. Observou-se um maior número de indivíduos sobre as carcaças congeladas (338 e 180) em comparação com as duas frescas (103 e 45). Os testes foram baseados nas espécies mais abundantes. A mediana das espécies de Oxelytrum diferiu significativamente entre as carcaças (H = 12,47844; p = 0,0059). As duas carcaças frescas diferiram significativamente (U = 190,0; p = 0,00019), porém não houve diferença significativa entre as carcaças congeladas (U = 336,0; p = 0,29755). Os dados indicaram que o processo de congelamento evitou que algumas espécies colonizassem as carcaças, neste caso com dominância de espécies de Oxelytrum. Estes dados também indicam a necessidade de cuidado ao utilizar carcaças congeladas em estudos de entomologia forense.

Evaluación práctica de las alteraciones postmortem debidas a la actividad de los artrópodos / Alterations practice postmortem evaluation of activity due to arthropods

Tras la muerte de un organismo vivo, la actividad de los insectos es el principal mecanismo por el que la materia orgánica en descomposición se reintegra en la cadena alimenticia. No obstante, hay que tener en cuenta que dicha actividad puede implicar modificaciones de gran interés tafonómico y forense. Si no se conoce bien su magnitud, pueden inducir al error en el posterior análisis del patólogo forense. En este artículo, damos una clasificación organizada de los diferentes fenómenos tafonómicos inducidos por insectos (adición, eliminación y modificación del cadáver) y enunciamos los caracteres diferenciales que permiten separarlos de procesos patológicos similares, centrando nuestra atención en los órdenes Coleoptera, Diptera y Lepidoptera como principales causantes de estas modificaciones...

After death of a living organism, the activity of insects is the main mechanism by which decomposing organic matter returns to the nutritional chain. However, it is necessary to consider that this activity can imply modifications of great taphonomic and forensic interest. If its magnitude is not known well, it can induce to error in the later analysis of the forensic pathologist. In this article, we give an organized classification of the different taphonomic phenomena induced by insects (addition, elimination and modification of the corpse) and enunciate the differential features that allow to separate them from similar pathological processes, focusing our attention on the orders Coleoptera, Diptera and Lepidoptera as the main responsibles of these modifications...

Sarcophagidae and Calliphoridae related to Rhinella schneideri (Anura, Bufonidae), Bothrops moojeni (Reptilia, Serpentes) and Mabuya frenata (Reptilia, Lacertilia) carcasses in Brasília, Brazil / Sarcophagidae e Calliphoridae associados às carcaças de Rhinella schneideri (Anura, Bufonidae), Bothrops moojeni (Reptilia, Serpentes) e Mabuya frenata (Reptilia, Lacertilia) em Brasília, Distrito Federal, Brasil

Sarcophagidae and Calliphoridae related to Rhinella schneideri (Anura, Bufonidae), Bothrops moojeni (Reptilia, Serpentes) and Mabuya frenata (Reptilia, Lacertilia) carcasses in Brasília, Brazil. This paper presents a list of necrophagous insects associated with small size carrions of two reptiles and one amphibian, found in areas of riparian forests and Cerrado sensu stricto physiognomies in a Conservation Unit located in Brasilia, Distrito Federal. We found seven species of insects related to these carcasses, being five Sarcophagidae, one Calliphoridae and one Braconidae parasitoid wasp. Lucilia eximia and Peckia (Pattonella) intermutans were the most abundant species in the study, corroborating with other studies that suggests that these species have specializations for colonization of small size animal carcasses.

Sarcophagidae e Calliphoridae associados às carcaças de Rhinella schneideri (Anura, Bufonidae), Bothrops moojeni (Reptilia, Serpentes) e Mabuya frenata (Reptilia, Lacertilia) em Brasília, Distrito Federal, Brasil. Este trabalho apresenta uma lista de insetos decompositores associados a carcaças de pequeno porte de dois répteis e de um anfíbio, encontrados em áreas de matas de galeria e de cerrado sensu stricto em unidades de conservação do Distrito Federal. Foram encontradas sete espécies de insetos associados a essas carcaças, sendo cinco sarcofagídeos, um califorídeo e uma vespa parasitóide Braconidae. Lucilia eximia e Peckia (Pattonella) intermutans foram as espécies mais abundantes, corroborando com outros estudos que sugerem que estas espécies apresentam especializações para a colonização de carcaças menores.

Intra-puparial development of the females of Chrysomya albiceps (Wiedemann) (Diptera, Calliphoridae) / Desenvolvimento intra-pupal de fêmeas de Chrysomya albiceps (Wiedemann) (Diptera, Calliphoridae)

Intra-puparial development of the females of Chrysomya albiceps (Wiedemann) (Diptera, Calliphoridae). The chronology and morphological changes that take place during intra-puparial development of Chrysomya albiceps is described based on 254 specimens reared in the laboratory. Larvae were obtained from the eggs laid by a single female. The pre-pupae were separated according to the reduction of larval length and the degree of pigmentation and sclerotization of the cuticle. After pupation, 10 individuals were fixed in Carnoy's solution and preserved in 70% ethanol, 10 individuals were fixed every 3 hours up to complete the first 24 hours (n = 80), the remaining individuals were fixed every six hours up to the 90th hour (n = 110) when 54 females emerged. The pupae were immersed in 5% formic acid for 48 hours and maintained in 70% ethanol, and then dissected and analyzed. C. albiceps shows four intra-puparial stages, each of which were described and compared with those described for Musca domestica, Calliphora erythrocephala, Sarcophaga bullata, Cuterebra tenebrosa, Oestrus ovis and Dermatobia hominis. Four developmental stages may be described: (1) the larva-pupa apolysis, after three hours; (2) the criptocephalic pupa, after six hours; (3) the phanerocephalic pupa, after nine hours; (4) the pharate pupa, after nine hours. The pharate adult is completely formed after 81 hours.

Desenvolvimento intra-pupal de fêmeas de Chrysomya albiceps (Wiedemann) (Diptera, Calliphoridae) A cronologia e as mudanças morfológicas que ocorrem durante o desenvolvimento intra-pupal de Chrysomya albiceps são descritos com base em 254 espécimes criados em laboratório. As larvas foram obtidas a partir os ovos postos por uma única fêmea. As pré-pupas foram separadas de acordo com a redução do comprimento larval, o grau de pigmentação e esclerotização da cutícula, depois da formação das pupas, 10 indivíduos foram fixados em solução de Carnoy e conservados em etanol 70%, e 10 indivíduos foram fixados a cada 3 horas, até completar as primeiras 24 horas (n = 80), os demais indivíduos foram fixados a cada seis horas até a hora 90 (n = 110), quando 54 fêmeas haviam emergido. As pupas foram imersas em de ácido fórmico a 5% por 48 horas e mantidos em etanol 70%, e então dissecados e analisados. C. albiceps mostrou quatro estágios intra-pupais, que foram descritos e comparados com aqueles descritos para Musca domestica, Calliphora erythrocephala, Sarcophaga bullata, Cuterebra tenebrosa, Oestrus ovis e Dermatobia hominis.Quatro estágios de desenvolvimento podem ser descritos: (1) apólise da larva-pupa, depois de três horas; (2) a pupa criptocefálica, depois de seis horas, (3) a pupa fanerocefálica, depois de nove horas, e a pupa farada após nove horas. O adulto farado está completamente formado após 81 horas.

Morfometría geométrica alar para la identificación de Chrysomya albiceps y C. megacephala (Diptera: Calliphoridae) de Venezuela / Geometric wing morphometrics for Chrysomya albiceps and C. megacephala identification (Diptera: Calliphoridae) from Venezuela

Calliphoridae is one of the families with the greatest number of species with forensic importance, which immature stages feed and develop on decaying material. in Venezuela, there are few studies on this taxon reporting the dominance of Chrysomya over other carrion flies. The goal of this study was to analyze the variations on wing morphometrics, to support the identification of two forensic flies. For this we photographed a total of 168 wings from C. albiceps (n=111) and C. megacephala (n=57). Landmark coordinate (x, y) configurations were registered and aligned by Generalized Procrustes Analysis. Principal Component Analysis and shape significance test based on Procrustes distance were implemented. Statistical analysis of variance found significant differences in wing isometric size (Kruskal-Wallis). The PCA showed the separation between species, and shape test showed significant differences (F Goodall´s). The main differences between both species were localized on subcosta rupture, join of R2+3 with wing border, join of dm-cu, and join of Cu with bm-cu, suggesting that wing morphometrics is a suitable tool in the discrimination of blowfly species.

Calliphoridae es una de las familias con el mayor número de especies de importancia forense, donde sus fases inmaduras se alimentan y desarrollan sobre material en descomposición. En Venezuela, son pocos los estudios en este taxon, sin embargo se ha reportado la dominancia del género Chrysomya sobre los otros dípteros. El objetivo fue analizar la variación morfométrica en la arquitectura alar, como herramienta de apoyo a la identificación de dípteros de importancia forense. Se fotografiaron 168 alas de C. albiceps (n=111) y C. megacephala (n=57) y se registraron configuraciones de coordenadas (x, y), se alinearon mediante Análisis Generalizado de Procrustes. Se efectuaron Análisis de Componentes Principales y comparaciones pareadas entre distancia parcial de Procrustes. El análisis estadístico de varianza encontró diferencias en el tamaño isométrico del ala (Kruskal-Wallis). El ACP mostró la separación de ambas especies, y la prueba de configuraciones determinó diferencias significativas (F Goodall). Las principales diferencias entre ambas especies se encontraron en: ruptura de la subcosta, unión de R2+3 con el borde del ala, unión dm-cu, y unión de Cu con dm-cu, lo que confirma que la morfometría alar es una herramienta idónea en la discriminación de especies de Calliphoridae.

Necrophagous species of Diptera and Coleoptera in northeastern Brazil: state of the art and challenges for the Forensic Entomologist / Espécies necrófagas de Diptera e Coleoptera na Região Nordeste do Brasil: estado da arte e desafios para o Entomologista Forense

Inventories on necrophagous insects carried out in Brazil encompass mostly species from the southeastern and central-western regions of the country. This review aims to produce the first checklist of necrophagous Diptera and Coleoptera species of forensic relevance in northeastern Brazil, an area that concentrates high rates of homicides. We performed a literature survey on scientific articles, theses and dissertations regarding necrophagous insect species in the region, and contacted scientists who develop research on forensic entomology. Fifty-two species of Diptera belonging to eight families with previous record of necrophagy were reported in the region: Sarcophagidae, Calliphoridae, Muscidae, Fanniidae, Piophilidae, Phoridae, Anthomyiidae and Stratiomyidae. Coleopteran species from six families of forensic relevance were registered, although taxonomical identification remained superficial. Bait traps were the most frequent methodology used, followed by collection on animal carcasses. Seven Dipteran species from two families were registered on human cadavers. All species had been previously reported in other Brazilian states and/or other countries, although none has been effectively used in legal procedures in the region. The status of research on forensic entomology in northeastern Brazil is incipient, and the checklist produced here contributes to the knowledge on the local diversity of necrophagous insects.

Inventários de insetos necrófagos no Brasil abordam em sua maioria espécies das regiões Sudeste e Centro-Oeste do país. Esta revisão visa apresentar um checklist de espécies necrófagas de Diptera e Coleoptera de importância forense no Nordeste brasileiro, uma área que concentra elevadas taxas de homicídio. Nós conduzimos uma revisão bibliográfica consultando artigos, teses e dissertações sobre espécies necrófagas na região, e contatamos cientistas que desenvolvem pesquisa em entomologia forense. Cinquenta e duas espécies de Diptera pertencentes a oito famílias com registro prévio de necrofagia foram registrados na região: Sarcophagidae, Calliphoridae, Muscidae, Fanniidae, Piophilidae, Phoridae, Anthomyiidae e Stratiomyidae. Espécies de Coleoptera de seis famílias de importância forense foram listadas, embora a identificação taxonômica tenha sido superficial. Armadilhas contendo iscas foram o método de coleta mais frequente, seguidas de coleta sobre carcaças animais. Sete espécies de Diptera pertencentes a duas famílias foram registradas sobre cadáveres humanos. Todas as espécies haviam sido previamente registradas em outros estados brasileiros e/ou em outros países, embora nenhuma tenha sido efetivamente utilizada em procedimentos legais na região. O status da pesquisa em entomologia forense no Nordeste do Brasil é incipiente, e o checklist apresentado neste trabalho contribui para sistematizar o conhecimento sobre a diversidade local de insetos necrófagos.

Chrysomya albiceps (Wiedemann) and Hemilucilia segmentaria (Fabricius) (Diptera, Calliphoridae) used to estimate the postmortem interval in a forensic case in Minas Gerais, Brazil

ABSTRACT. Chrysomya albiceps (Wiedemann) and Hemilucilia segmentaria (Fabricius) (Diptera, Calliphoridae) used to estimate the postmortem interval in a forensic case in Minas Gerais, Brazil. The corpse of a man was found in a Brazilian highland savanna (cerrado) in the state of Minas Gerais. Fly larvae were collected at the crime scene and arrived at the laboratory three days afterwards. From the eight pre-pupae, seven adults of Chrysomya albiceps (Wiedemann, 1819) emerged and, from the two larvae, two adults of Hemilucilia segmentaria (Fabricius, 1805) were obtained. As necrophagous insects use corpses as a feeding resource, their development rate can be used as a tool to estimate the postmortem interval. The post-embryonary development stage of the immature collected on the body was estimated as the difference between the total development time and the time required for them to become adults in the lab. The estimated age of the maggots from both species and the minimum postmortem interval were four days. This is the first time that H. segmentaria is used to estimate the postmortem interval in a forensic case.

Chrysomya albiceps (Wiedemann) e Hemilucilia segmentaria (Fabricius) (Diptera, Calliphoridae) utilizadas para estimar o intervalo pós-morte em um caso forense em Minas Gerais, Brasil. O cadáver de um homem foi encontrado em uma área de cerrado no Estado de Minas Gerais. Larvas de moscas foram coletadas na cena do crime e encaminhadas ao laboratório em três dias. Os adultos que emergiram em laboratório foram identificados como Chrysomya albiceps (Wiedemann, 1819) e Hemilucilia segmentaria (Fabricius, 1805). Uma vez que insetos utilizam o cadáver como uma fonte de recurso alimentar, sua taxa de desenvolvimento pode ser empregada como uma ferramenta para estimar o intervalo pós-morte. O estágio de desenvolvimento pós-embrionário dos imaturos coletados no cadáver foi estimado como sendo a diferença entre o tempo total de desenvolvimento e o tempo necessário para a emergência destes adultos em laboratório. A idade estimada dos imaturos das duas espécies, bem como o intervalo pós-morte mínimo, foi de quatro dias. Este é o primeiro relato do uso de Hemilucilia segmentaria para estimar o intervalo pós-morte em um caso forense.

The effect of environment on development and survival of pupae of the necrophagous fly Ophyra albuquerquei Lopes (Diptera, Muscidae)

The effect of environment on development and survival of pupae of the necrophagous fly Ophyra albuquerquei Lopes (Diptera, Muscidae). Species of Ophyra Robineau-Desvoidy, 1830 are found in decomposing bodies, usually in fresh, bloated and decay stages. Ophyra albuquerquei Lopes, for example, can be found in animal carcasses. The influence of environmental factors has not been evaluated in puparia of O. albuquerquei. Thus, the focus of this work was motivated by the need for models to predict the development of a necrophagous insect as a function of abiotic factors. Colonies of O. albuquerquei were maintained in the laboratory to obtain pupae. On the tenth day of each month 200 pupae, divided equally into 10 glass jars, were exposed to the environment and checked daily for adult emergence of each sample. We concluded that the high survival rate observed suggested that the diets used for rearing the larvae and maintaining the adults were appropriate. Also, the data adjusted to robust generalized linear models and there were no interruptions of O. albuquerquei pupae development within the limits of temperatures studied in southern Rio Grande do Sul, given the high survival presented.

Efeito de fatores ambientais sobre o desenvolvimento e sobrevivência de pupas de Ophyra albuquerquei Lopes (Diptera, Muscidae). Espécies de Ophyra Robineau-Desvoidy, 1830 são encontradas em corpos em decomposição, usualmente nas fases fresca, inchamento e murcha. Entre estas espécies, Ophyra albuquerquei Lopes, 1985 pode ser encontrada em carcaças de ratos e coelhos. A influência de fatores ambientais sobre pupas de O. albuquerquei não tinha sido avaliada até o momento. Desta maneira, o foco deste trabalho foi motivado pela necessidade por modelos de previsão do desenvolvimento de insetos necrófagos em função de fatores abióticos. Colônias de O. albuquerquei foram mantidas em laboratório para a obtenção de pupas. Até o décimo dia de cada mês, 200 pupas distribuídas em 10 frascos de vidro foram expostas ao meio e foi verificada diariamente a emergência dos adultos de cada amostra. Os dados se ajustaram a modelos lineares generalizados robustos. Além disto, foi concluído que não existem limiares mínimos e máximos de temperatura para o desenvolvimento de pupas de O. albuquerquei no sul do Rio Grande do Sul, devido à alta sobrevivência apresentada.